HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸的含量*

作者：张燕 何兵 杨世艳

【摘要】： 建立HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸( 新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4- 二咖啡酰奎宁酸、3，5 - 二咖啡酰奎宁酸及4，5- 二咖啡酰奎宁酸) 含量的方法。

• 【关键字】：
• 有机酸的含量

• 【参考文献】：
• 参考文献1 ChP( 中国药典) . 2010. Vol Ⅰ( 一部) : 4652 CAI Jie - ying( 蔡洁英) ，LIANG Hui( 梁晖) ，CAI Song - tao( 蔡松涛) . Study on determination of chlorogenic acid in Kouyanqing granuleby HPLC and its stability( 口炎清颗粒中绿原酸HPLC 测定及其稳定性考察) . Res Pract Chin Med( 现代中药研究与实践) ，2004，18( 3) : 363 XIN Ning( 辛宁) ，WANG Liu - ping( 王柳萍) ，ZHANG Shou -ping ( 张守平) ，et al. Determination of chlorogenic acid in FlosLonicerae Hypoglaucae from Guangxi province( HPLC 法测定广西红腺忍冬中绿原酸含量) . Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志) ，2009，29( 5) : 8494 WU Wei - hua( 吴卫华) ，KANG Zhen( 康桢) ，OUYANG Dong -sheng( 欧阳冬生) ， et al. Progresses in the pharmacology of chlorogenic acid( 绿原酸的药理学研究进展) . Nat Prod Res Dev( 天然产物研究与开发) ，2006，18( 4) : 6915 JI Yu - bin( 季宇彬) . Pharmacology and Application of EffectiveComponents in Traditional Chinese Medicine( 中药有效成分药理与应用) . Harbin( 哈尔滨) : Heilongjiang Science and TechnologyPress( 黑龙江科学技术出版社) ，1995. 916 LI Zu - sheng( 李祖晟) ，ZHU Zhi - an( 朱志安) . Research progress onpharmacological experiment of dicaffeoylquinic acid( 二咖啡酰奎宁酸药理实验研究进展) . Med Recapit( 医学综述)， 2004， 10( 4) : 2497 WANG Rong - mei( 王荣梅) ，XU Li - hua( 徐丽华) ，LIN Yong -qiang ( 林永强) . HPLC simultaneous determination of six caffeoylquinicacids in Yinhuang buccal tablets( HPLC 法同时测定银黄含片中6 个咖啡酰奎宁酸类成分的含量) . Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志) ，2012，32( 1) : 578 HE Bing( 何兵) ，YANG Shi - yan( 杨世艳) ，ZHANG Yan( 张燕)， etal. HPLC simultaneous determination of 10 active constituents in Yinhuang buccal tablets( HPLC 同时测定银黄含片中10 个活性成分的含量) . Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志)， 2012， 32( 10) : 1853 9 XING Li - hong( 邢丽红) ，LI Wen - long( 李文龙) ，QU Hai - bin=( 瞿海斌) . Rapid determination of 5 kinds of organic acid in Flos=Lonicerae extracts by UV spectroscopy( 金银花提取物中5 种有机酸含量测定的紫外光谱法) . Chin J Pharm Anal( 药物分析杂=志) ， 2011， 31( 3) : 547=10 MA Shuang - cheng( 马双成) ，BI Pei - xi( 毕培曦) ，HUANG Rong=- chun( 黄荣春) ， et al. Determination of the antiviral caffeoyl quinic=acids isolated from Lonicera japonica Thunb. ( 金银花药材中抗=呼吸道病毒感染的咖啡酰奎宁酸类成分的定量研究) . Chin J=Pharm Anal( 药物分析杂志) ，2=005， 25( 7) : 751=11 CHEN Jun( 陈俊) . Study on the chemical substance and preparative=process of the extract of Flos Lonicerae( 金银花提取物的物质基础=和制备工艺研究) . Zhejiang( 浙江) : Zhejiang University( 浙江大=学) ， 2010. 22=12 HE Bing( 何兵) ，YANG Shi - yan( 杨世艳) ，ZHANG Yan( 张燕) ，=et al. HPLC simultaneous determination of eight active constituents in=Qingyin injection( HPLC 同时测定青银注射液中8 种活性成分的=含量) . Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志) ， 2012， 32( 2) : 224=13 CHEN Gang( 陈钢) ，HOU Shi - xiang( 侯世祥) ，HU Ping( 胡平) ，=et al. Studies on stability of chlorogenic acid in extract of Flos=Lonicerae( 金银花提取物中绿原酸的稳定性研究) . China J Chin=Mater Med( 中国中药杂志) ，2=003， 28( 3) : 223

HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸的含量*

张燕¹，何兵^2**，杨世艳³

( 1. 泸州医学院附属医院手麻科，泸州646000; 2. 泸州医学院药物研究中心，泸州646000;

3. 泸州医学院附属中医医院超声影像科，泸州646000)

摘要 目的: 建立HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸( 新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4- 二咖啡酰奎宁酸、3，5 - 二咖啡酰奎宁酸及4，5- 二咖啡酰奎宁酸) 含量的方法。方法: 采用AkzoNobel Kromasil C₁₈( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm) 色谱柱，柱温30 ℃，以乙腈- 0. 1%磷酸水溶液进行梯度洗脱，流速1. 0 mL·min ^{- 1} ，检测波长326 nm。结果: 7 个成分的线性关系良好，精密度、稳定性、重复性的RSD 均低于3%，加样回收率为97. 75% ～ 99. 33%。结论: 该方法可用于口炎清颗粒多指标质量控制。

关键词: 高效液相色谱; 口炎清颗粒; 新绿原酸; 绿原酸; 隐绿原酸; 咖啡酸; 二咖啡酰奎宁酸; 质量控制; 标准提高; 中药制剂          中图分类号: R917        文献标识码: A          文章编号: 0254 - 1793( 2013) 01 - 0108 - 04

HPLC simultaneous determination of seven organic

acids in Kouyanqing granules*

ZHANG Yan¹，HE Bing^2**，YANG Shi - yan³

( 1. Department of Operation and Anaesthesia，Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China;

2. Research Center for Drug，Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China;

3. Department of Ultrasonic Image，Affiliated TCM Hospital to Luzhou Medical College，Luzhou 646000，China)

Abstract Objective: To establish an HPLC method for the simultaneous determination of 7 organic acids( neochlorogenicacid，chlorogenic acid，cryptochlorogenic acid，caffeic acid，3，4- dicaffeoylquinic acid，3，5- dicaffeoylquinicacid and 4，5- dicaffeoylquinic acid) in Kouyanqing granules. Methods: The chromatographic separation was performedon a AkzoNobel Kromasil C₁₈( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm) column， the column temperature was maintained at 30 ℃. A gradient elution of acetonitrile - 0. 1% phosphoric acid aqueous solution was adopted at the flow rate of 1mL·min - 1 . The UV detection wavelength was 326 nm. Results: All the 7 compounds showed good linearity in the range of the test concentration. The RSDs of the precision， reproducibility and stability tests were less than 3%， the average recoveries of them were in the range of 97. 75% - 99. 33%. Conclusion: The method can be applied for the multi - indictor quality control of Kouyanqing granules.

Key words: HPLC; Kouyanqing granules; neochlorogenic acid; chlorogenic acid; cryptochlorogenic acid; caffeic acid; dicaffeoylquinic acid; quality control; standard improvement; Chinese medicine preparation

口炎清颗粒是由山银花、玄参、天冬、麦冬、甘草5 味药组成的中药制剂，具有滋阴清热、解毒消肿的功效，主要用于阴虚火旺所致的口腔炎症^[1]。有机酸为山银花和口炎清颗粒所含的主要活性成分，中国药典和文献均是采用HPLC 单独测定绿原酸的含量^{[1 - 3]}，山银花除绿原酸外尚含有新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4- 二咖啡酰奎宁酸、3，5- 二咖啡酰奎宁酸及4，5- 二咖啡酰奎宁酸等有机酸。近代药理研究表明绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性^[4]，咖啡酸具有抗菌、抗病毒、止血等功效^[5]，二咖啡酰奎宁酸类具有抗菌、抗炎、抗氧化、降血脂及抗HBV 及HIV 等作用^[6]。其均与口炎清颗粒功效相近，