HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸的含量*

作者：张燕 何兵 杨世艳

【摘要】： 建立HPLC 同时测定口炎清颗粒中7 个有机酸( 新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4- 二咖啡酰奎宁酸、3，5 - 二咖啡酰奎宁酸及4，5- 二咖啡酰奎宁酸) 含量的方法。

• 【关键字】：
• 有机酸的含量

• 【参考文献】：
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2. 4 线性关系考察精密量取“2. 2. 1”项下对照品储备液0. 5、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0 mL，分别置于25 mL 棕色量瓶中，加50% 甲醇稀释至刻度，摇匀，即得系列对照品溶液。分别取10 μL 平行进样测定3 次，以峰面积平均值A 对进样量C( μg) 进行线性回归，得回归方程。见表1。

表1 7 个成分的线性关系
Tab 1 Results of linear equations of 7 components

 2. 5 精密度试验精密吸取“2. 2. 1”项下混合对照品溶液10 μL，按“2. 1”项下色谱条件连续进样6次，测得新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4-二咖啡酰奎宁酸、3，5- 二咖啡酰奎宁酸及4，5- 二咖啡酰奎宁酸峰面积的RSD( n = 6) 分别为0. 33%、0. 25%、0. 29%、0. 56%、0. 44%、0. 39%、0. 48%，表明仪器精密度良好。2. 6 重复性试验取同一批样品( 批号D0A012) ，照“2. 2. 2”项下方法，平行制备6 份供试品溶液，分别进样测定，结果新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4- 二咖啡酰奎宁酸、3，5- 二咖啡酰奎宁酸及4，5 - 二咖啡酰奎宁酸平均含量( n = 6) 分别为0. 117、1. 066、0. 115、0. 023、0. 059、0. 502、0. 246 mg·g - 1，RSD 分别为0. 67%、0. 53%、0. 61%、0. 82%、0. 75%、0. 62%、0. 58%，表明本法重复性良好。2. 7 稳定性试验取样品( 批号D0A012) 的供试品溶液，分别于制备后0、4、8、24、36、48 h 进样测定。结果新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3，4 - 二咖啡酰奎宁酸、3，5 - 二咖啡酰奎宁酸及4，5 - 二咖啡酰奎宁酸峰面积的RSD( n = 6) 分别为0. 86%、0. 73%、0. 82%、1. 0%、1. 1%、0. 96%、0. 89%，表明供试品溶液在48 h 内稳定。2. 8 加样回收率试验精密吸取已知含量的样品( 批号D0A012) 9 份，每份约2. 5 g，分成3 组，每组3份，分别精密添加含新绿原酸0. 118 mg·mL ^{- 1}、绿原酸1. 067 mg·mL ^{- 1}、隐绿原酸0. 115 mg·mL ^{- 1}、咖啡酸0. 023 mg·mL ^{- 1}、3，4 - 二咖啡酰奎宁酸0. 059 mg·mL ^{- 1}、3，5- 二咖啡酰奎宁酸0. 501 mg·mL ^{- 1}及4，5- 二咖啡酰奎宁酸0. 248 mg·mL ^{- 1}的混合对照品溶液2. 0、2. 5、3. 0 mL，照“2. 2. 2”项下方法制备供试溶液，按“2. 1”项下色谱条件测定，并分别计算低、中、高3 组浓度下的平均回收率和总平均回收率，结果见表2。试验结果表明，本法具有良好的回收率。

表2 7 个成分回收率试验结果
Tab 2 Results of recovery test of 7 components